Jour 2, la culture cellulaire Bonjour à tous et bienvenue sur
pastapace dans le calendrier de l'Avent des méthodes d'étude
pour le mois de novembre. Aujourd'hui on va parler de la
culture cellulaire en biologie, c'est parti.
Alors aujourd'hui on commence vraiment avec la méthode chill
hein, vraiment on rentre dans le bain tout doucement et puis à
partir de demain, on va commencer à rentrer dans dans
les vraies vraies méthodes d'étude.
La culture cellulaire, c'est un peu le premier truc qu'on vend
en biologie, c'est assez sympa et puis ça s'explique un peu par
soi-même, on cultive des cellules, voilà.
La culture cellulaire, donc j'ai des cellules d'intérêt et puis
je viens pour m'amuser à travailler dessus et quelque
part c'est un peu le point de départ.
Quelque part c'est un peu le point de départ.
Bon bref, c'est un peu le point de départ en biologie, parce que
bah mine de rien, la biologie cellulaire, son unité de base,
ce qui va me permettre d'étudier la biologie, c'est la cellule.
Enfin la réponse est dans le non biologie cellulaire.
Et puis la bio c'est déjà la vie et la vie, ça démarre avec la
cellule donc. On parle des cellules ?
OK, encore une fois on n'est pas dans le monde merveilleux de
Disney, on est dans la vraie vie, donc les cellules on sait
pas, on n'est pas comme ça en train de les prendre et puis de
les manipuler comme si elles étaient très grosses.
C'est pas des ballons, c'est des trucs riquiqui et donc il faut
réussir à avoir les conditions qui me permettent de travailler
là-dessus. En d'autres termes, la culture
cellulaire, c'est pas une méthode d'étude qu'on va vous
balancer le jour de l'examen en vous dire voilà on cultive les
cellules, qu'est ce qui se passe ?
On peut éventuellement vous poser la question mais c'est
très souvent la première étape avant de faire autre chose.
Avant de faire une cytométrie en flux avant de faire peut être
une modification génétique avant de faire un chrysper K 9 avant
de faire. Bref, on a besoin au départ
d'avoir ces cellules et comme les cellules elles ne sont pas
en train de flotter de nulle part.
J'ai dit flotter, vous connaissez la règle.
Et donc si je veux pouvoir étudier les cellules, Ben j'ai
d'abord besoin de pouvoir les cultiver.
Ça veut dire quoi ? Bah les cultiver ça veut dire
réussir à créer les conditions qui permettent à mes cellules de
pouvoir survivre. Déjà c'est quand même un peu le
le le BA ba. Mais au-delà d'assurer leur
survie, je peux idéalement et pourquoi pas d'ailleurs assurer
leur prolifération si jamais mon type cellulaire est un type qui
peut se proliférer et donc se diviser, se multiplier.
Donc la question qu'on va se poser c'est comment est ce que
je fais pour assurer ces conditions là ?
Bah il faut pas chercher très très loin hein.
La cellule c'est ce qui nous constitue nous.
Donc ce dont moi j'ai besoin c'est grosso merdo à peu de
choses près ce dont la cellule a besoin, parce que moi je ne suis
rien d'autre qu'une addition de cellules, enfin rien d'autre
d'un point de vue purement biologique du moins c'est à peu
près ça quoi. Et donc qu'est ce que j'ai
besoin moi pour pouvoir survivre ?
Bah je sais pas moi si demain je vous coupe l'accès à l'eau
potable et à l'alimentation vous allez pas faire très long feu
même si cette notion a peut être plus du mal à rentrer dans la
tête de certaines personnes que d'autres et donc du coup au
niveau cellulaire bah Ben c'est un peu kif kif.
Il faut que je puisse donner les ressources nécessaires pour pour
assurer la survie des cellules. Donc parmi les ressources qu'est
ce qu'on a ? Bah Premièrement ça coule de
source, l'eau encore une fois ça coule de source mais peut être
pas pour tout le monde. Donc j'ai besoin d'avoir de
l'eau d'accord, mais j'ai besoin également d'avoir des
nutriments. Quoi comme nutriment et Ben tout
ce qui permet à la cellule d'assurer son métabolisme,
d'assurer sa respiration, d'assurer en gros tout
simplement sa vie et sa survie. Donc des acides aminés, des
vitamines, des protéines, des acides nucléiques pour pouvoir
permettre d'assurer la transcription et la réplication
de l'a DN. On peut rajouter à ça des sels,
des sels minéraux et on peut également rajouter des lipides.
Donc en gros je te donne un peu le Starter pack de métabolisme
donc protéine, lipide, glucides, je te rajoute de la flotte, je
te rajoute un peu de sérum éventuellement et je te rajoute
des sels pour faire en sorte que grosso modo je puisse te
permettre d'assurer ton métabolisme et donc quelque part
ta survie. Bien maintenant on fait de la
culture cellulaire, d'accord, ça vous aura pas échappé qu'on
n'est pas constitué de la même cellule identique.
Enfin je veux dire, on n'est pas dans la tête des clones dans
Star Wars première et dernière référence que je vais sur Star
Wars parce que je suis très mauvais dans Star Wars.
Mais en gros, j'ai plusieurs types cellulaires.
Je veux dire, c'est pas la même chose de faire la culture
cellulaire d'une cellule, je sais pas moi musculaire ou d'une
cellule, du foie, les hépatocytes, ou d'une cellule du
pancréas, ou d'une cellule, de la peau, d'une cellule, d'un,
d'un neurone, et cetera. Parce que j'ai plusieurs types
cellulaires. Ben qui ont besoin d'avoir des
milieux peut être sensiblement différents en composition, qui
ont des temps de réplication différents.
Qui peut être d'ailleurs ne se multiplie pas du tout.
Vous allez mettre des neurones en cellule, vous m'appelez quand
il y a une division, hein ? Parce que les neurones ne se
divisent pas. Et donc vous voyez que la
culture cellulaire, c'est un principe un peu classique de tu
prends une boîte et puis tu fous les cellules et puis tu leur
donnes ce qu'il faut pour survivre.
Mais enfin bon, le type cellulaire vient largement faire
varier les manipulations que je vais faire, parce que si je vous
dis ma cellule, elle se divise comme ça et elle se reproduit,
elle se reproduit, elle se reproduit comme ça à tout va,
c'est des lapins. Bah qu'est ce qui va se passer ?
Au bout d'un moment ma boîte elle va être pleine en fait je
vais prendre ma petite boîte comme ça, super trop bien trop
cool. Je suis au labo, je mets des
cellules, peut être pas beaucoup au début, je leur mets les
nutriments, je leur donne également, il faut pas
l'oublier, les constantes de température et de pression.
Alors la pression on y pense pas souvent mais la température oui.
Des fois les températures ont besoin d'être assez élevées, des
fois c'est 37°, des fois des cellules qui poussent avec un
peu moins, un peu plus, surtout pour les bactéries.
Bon, les bactéries c'est autre chose.
On va rester sur la la culture de cellules eucaryotes et donc
au-delà de la température, au-delà de la pression, il y a
aussi la notion du temps. Parce que si jamais vous mettez
des cellules qui se reproduisent comme des fous furieux et vous
revenez tranquillement voir votre boîte plus tard, bah les
cellules elles se sentent divisées.
Bon je vais pas vous apprendre ce que c'est que les
mathématiques, mais quand vous faites fois 2*2*2*2, au bout
d'un moment ça fait beaucoup hein.
Mine de rien, il suffit de faire 10 fois fois 2 pour avoir un
facteur 1000. Voilà 10 puissance 2 puissance
10 ça fait 1024. Et donc en gros bah vous allez
avoir une boîte où il y a beaucoup de cellules, mais dit
donc Michel, est ce que l'espace est infini ?
C'est une bonne question. Michel, non, l'espace n'est pas
infini, vous démarrez avec une petite boîte, vous revenez dans
2 ou 3 jours, la boîte elle est toujours petite en fait.
Et donc qu'est ce qui va se passer quand ces cellules vont
tellement se diviser qu'elles vont littéralement occuper toute
la place ? Bah elles vont occuper le
maximum d'espace et donc elles ne pourront plus se diviser.
Donc là ça commence à foutre la merde.
J'ai une chambre relativement grande, d'accord, je suis tout
seul, on peut être 2, on peut monter à 4, on va monter à 8, à
16, 32, 64, non 64, on rentre pas chez moi et donc je vais
arriver à une étape qu'on appelle la confluence.
Donc on dit Ah mes cellules elles sont à confluence, en vrai
ça veut dire elles sont à confluence.
Enfin sans dire que j'ai tellement eu de multiplications,
j'ai tellement eu de réplications cellulaires, bah
que mes cellules elles sont littéralement à touche touche et
qu'elles n'ont plus la place de pouvoir se diviser.
Mais c'est pas qu'une notion de place, la confluence c'est aussi
une notion de ressources parce que j'ai des invités chez moi,
j'ai mis un peu de chips et j'ai mis je sais pas moi, du cacamol
des cochonneries comme ça sur la table.
Oui au bout d'un moment la Chambre va être pleine, mais y
aura même plus à comment dire, y aura même plus assez à bouffer.
Donc en vérité, la confluence c'est aussi bien d'un d'un
comment dire ? D'un point de vue espace, j'ai
plus d'espace, mais aussi j'ai plus de ressources parce que
j'ai consommé tout ce qu'il y avait en nutriments, en glucose,
et cetera, et cetera. Et je peux même aller plus loin,
on est des êtres vivants, on fait du métabolisme matin, 12h00
et soir, donc les cellules elles consomment, d'accord, mais elles
ont également des déchets. Le métabolisme c'est pas les
poubelles jaunes. Je veux dire, au bout d'un
moment, il y a quelque chose qui revient, vous faites la
respiration, bim, je t'excrète du CO 2, vous faites du
métabolisme, Bim, Ben je j'excrète des métabolites, vous
faites des réactions bim, des fois vous pouvez avoir des
radicaux libres. Vous pouvez dégager de
l'ammoniac. Enfin y a plein de déchets du
métabolisme, que ce soit des glucides, des lipides et des
protéines qui fait que au bout d'un moment, non seulement j'ai
plus de place, déjà c'est la merde, en plus j'ai plus de
nutriments donc c'est la c'est la turbosos et en plus j'ai des
déchets et des déchets qui peuvent être toxiques avec les
cellules d'en face. Donc si tout le monde s'amuse à
jeter ces détritus dans le hall, alors oui elles sont plus dans
la cellule. D'accord on n'est plus chez
vous, vous mettez ça ailleurs, mais si tout le hall de
l'immeuble est rempli avec des poubelles, Ben la vie n'est plus
possi. S'il y a trop de personnes
collées comme ça les unes avec les autres, la vie n'est plus
possible, et si jamais il y a plus de nutriments, il y a plus
d'accès à l'eau, et cetera, la vie n'est plus possible non
plus. Et donc qu'est ce qui va se
passer à ce niveau là ? Ben on n'est pas des sadiques,
n'est ce pas ? Donc on va pas laisser les
cellules clubser comme ça comme de la merde.
Une fois qu'elles arrivent à confluence, on fait ce qu'on
appelle un passage, donc bon hein, sans avoir inventé la
pluie, le passage c'est Oh là là suspense, Ben c'est le fait de
les passer d'une boîte à l'autre.
Voilà abonne toi pour plus d'astuces.
Non je je déconne même pas. Donc les 2 mots qu'il faut
retenir de ce cours c'est la confluence, c'est à dire que en
gros j'ai vraiment gratté tout ce que je pouvais, je peux pas
aller au-delà et quand j'arrive justement à cette confluence, je
passe à le 2e mot qu'il faut retenir, le passage et donc je
passe d'une boîte à une autre. Donc vous vous doutez bien que
si on s'amuse juste à faire ça en se disant Oh là là ma boîte
elle est pleine, il faut que je prenne une note, puis une autre,
puis une autre. Bon, si vous êtes pas
complètement nuls en maths, si à chaque fois vous avez une
division, vous faites fois 2*2*2.
C'est à dire qu'au bout d'un moment il va me falloir un
nombre infini de boîtes. Donc on n'est pas en train de
voir les cellules se multiplier juste pour le kif de se dire
Ouais chez moi j'ai 10 milliards des pathocytes Ah Ah Ah dans ma
cave. Non on fait ça parce qu'on est
en biologie, donc je vais pas m'amuser à changer de milieu, à
changer de boîte, et cetera en permanence.
Je le fais parce que j'en ai besoin pour m'en étude.
Et peut être que mon étude prend trop de temps et ce qui fait que
j'ai besoin de faire un passage entre-temps.
Mais je veux dire je vais pas démarrer ma vie en mettant des
cellules dans une boîte et puis je vais changer de boîte et puis
je vais enfin je vais rajouter des boîtes comme ça tous les 2
jours. Voilà, au bout d'un moment, les
ressources dans la vraie vie sont également limitées.
Donc je fais ça parce que j'ai besoin de faire une
manipulation, parce que j'ai besoin de faire une expérience,
parce que j'ai besoin de prouver l'expression d'un gène, parce
que j'ai envie de voir l'efficacité de mon médicament,
parce que je veux faire des tests in vitro, et cetera.
Mais voilà, ne garde enfin comment dire, gardez en tête que
on A cet effet de ouais, je fais un passage, je change de boîte,
je rajoute du milieu, on le fait parce qu'il y a une finalité
derrière, on le fait pas en mode ouais, je joue au Sims ou au
tamagotchi, et puis je vais voir mes cellules comme ça pousser.
Voilà, c'est juste de la biologie niveau cellulaire, et
on le fait parce qu'on a des besoins d'un point de vue
d'études ou d'un point de vue d'éducation, et cetera.
OK, maintenant, petit quiz. Donc toutes les cellules ne sont
pas similaires, ce qui fait qu'on va avoir des besoins
différents, on va avoir peut être des consommations
différentes, et cetera. D'accord I get that, mais
au-delà de ça c'est pas juste, est ce que je me reproduis ou
pas, ou est ce que je consomme plus d'acide aminé ou plus de
glucose ou d'ébus ou autre ? C'est aussi comment je me
comporte dans la boîte et en vérité la cellule va se
comporter dans la boîte normalement à peu près comme
elle se comporte dans le corps. Bon elle va pas s'amuser à faire
des dingueries non plus, mais. Si c'est des cellules qui
viennent s'organiser pour faire un tissu solide compact, et
cetera. Et si c'est des cellules qui
flottent, je ne vais pas en mettre.
Mylène Farmer, ça ne va pas être la même chose.
Donc quand vous mettez vos cellules dans une petite boîte
avec votre liquide, bah en fait il y a 2 possibilités, soit les
cellules viennent adhérer aux parois de la boîte, soit les
cellules sont en train de flotter.
Bon là ça me gratte, il faut que je le remette.
Merci Mylène. Et donc du coup on comprend que
entre les cellules qui sont adhérentes à la boîte et les
cellules qui flottent, bah je vais pas du tout avoir la même
approche parce que vous comprenez quand les cellules
sont adhérentes, elles sont là à en train, comment dire en train
d'adhérer à la paroi. Donc du coup le liquide avec les
nutriments et cetera. Ben il est juste pour le coup
vraiment en train de flotter. Et les cellules, elles sont
comme ça, en train de faire des petits rangs et en train de de
coller tout simplement avec le fond de la paroi.
Donc le moment où mes nutriments seront complètement épuisés, Ben
je prends ma petite pipette, j'aspire donc j'aspire l'eau qui
reste avec tout simplement les déchets, parce que ils auront
pris toute la bouffe et ils auront jeté toutes leurs
poubelles. Donc les métabolites toxiques,
l'ammoniac, éventuellement des radicaux libres, les déchets du
métabolisme de façon simple. Et j'aspire tout le bordel.
Je prends mon super milieu nutritif et puis je viens, je
leur fais une nouvelle, une nouvelle livraison de stock.
Donc si jamais j'ai pas besoin que mes cellules se multiplient
davantage, je peux faire un passage du pauvre entre
guillemets. Donc je vais pas les prendre et
les diviser pour en mettre un peu dans une boîte, un peu dans
une autre boîte pour faire en sorte qu'ils aient plus de
place. Je peux les laisser comme tel et
juste changer le milieu. Parce que mes cellules sont
adhérentes. Donc finalement qu'est ce qu'on
se fait chier. Par contre si mes cellules sont
en train de flotter, si ce sont des cellules circulantes qui
flottent comme ça dans mon dans mon milieu, bah je peux pas
prendre ma pipette et puis absorber le liquide plein de
cochonneries. Bah parce que je vais absorber
les cellules avec Michel. Et donc là qui est sur 1000000
d'euros comment on fait ? Bah oui ça va.
Comment on fait ? Comment on fait pour ne prendre
que le liquide avec les cochonneries et ne pas toucher
aux cellules ? Alors je vais pas vous donner la
réponse directement, je vais juste vous donner un peu la
façon de réfléchir quand on est en bioscel ou en bioche.
Quand vous vous posez la question de comment on fait,
dites vous qu'est ce qui me permettrait de faire la
séparation ? Comment on fait pour détecter ça
au milieu de ça, comment est ce qu'on fait pour détecter cette
protéine au milieu de l'autre protéine, comment est ce qu'on
fait pour séparer, comment est ce qu'on fait pour isoler,
comment est ce qu'on fait pour vous voyez ce que je veux dire,
comment est ce qu'on fait pour repérer, voilà comment est ce
qu'on joue à où est Charlie ? Ben là, quel est le critère qui
sépare ma protéine, pardon, ma cellule avec le milieu ?
Ben c'est pas du tout la même taille, d'un côté on parle de
petites molécules qui flottent dans un liquide, de l'autre on
parle de super grosses cellules, alors oui c'est pas du tout la
même taille. Entre mes petits radicaux
libres, et cetera, et mes grosses cellules, c'est pas du
tout comparable, mais quand je prends ma pipette, ma pipette,
elle est très grande, que ce soit pour les protéines ou pour
les cellules, et donc je risque de tout absorber.
J'ai pas de pipette qui soit relativement à ce point, fine,
fine, fine, fine, fine, fine, fine, fine, fine, pour réussir à
isoler toutes les cellules. Ou alors même si je pourrais
éventuellement avoir ça, ça prendrait trop de temps, ce
serait chiant, ça prendrait trop d'argent.
Et donc comment est ce qu'on fait ?
Bah on se fait pas chier au fait, on absorbe tout ?
Ah là là là. Mais c'est horrible.
Mais non en fait parce que une fois que je les absorbe, je fais
pas comme pour les cellules adhérentes où je n'aurais
absorbé que le milieu avec les cochonneries que je fous à la
poubelle. Là j'absorbe tout, je les mets
dans un petit dans un petit tube pardon qu'on appelle
affectueusement les Falcon. Donc il y a des Falcon avec 5
ml, 10 ml 50 ml. Bon bref c'est avec plusieurs
contenances et mes petits Falcon je vais tout simplement les
mettre à la centrifugeuse centrifugeuse, pardon, oula.
Ne me jugez pas, il est 4 h du matin, donc quand je mets mon
liquide à la centrifugeuse, le liquide, il y a quoi ?
Il y a la flotte, d'accord, il y a les petites saloperies, les
petites cochonneries, l'ammoniac, les radicaux libres,
les métabolites, et cetera. Bon d'accord, hookers.
Et il y a les cellules, les cellules qui sont beaucoup,
beaucoup, beaucoup, beaucoup plus lourdes que le reste.
Donc je vais pas vous spoiler la centrification parce que c'est
quelque chose qu'on verra Ben dans ce calendrier de l'Avent.
Mais pour faire très simple, ce principe repose sur le fait que
plus je suis gros, plus je suis pas ta pouf, plus je vais couler
et moins je suis gros, plus je suis léger, plus je vais rester
en haut. Et donc quand je vais faire une
centrifugation, donc je vais mettre mes petits tubes dans une
machine qui va tourner très très très très très très très très
très très très vite. Ben les trucs qui sont très
lourds vont tomber dans le fond et les trucs qui sont pas trop
lourds vont rester en haut. Le truc qui est dans le fond.
Un truc bien solide, bien dégueulasse, c'est ce qu'on va
appeler le culot. Ah là là Michel, il manque pas
de culot. Bah là pour le coup le culot
c'est ce qu'il y a vraiment dans le fond, donc le cul ou là
j'avais une blague, mais je vais pas la faire pour ne pas mettre
l'épisode en explicite. Ah Ah Ah, ne m'écoute pas
Spotify. Et donc du coup ce qui va se
passer c'est que je vais réussir à distinguer ce qui a
complètement été rabougri dans le fond, le culot et ce qui est
au-dessus et qui nage. Ça nage au-dessus, hé on va
l'appeler le surnageant voilà non mais mais vraiment hein
genre quand vous voyez des mots qui font genre compliqué enfin
genre vous pétez et c'est rien qu'on qu'on soit d'accord c'est
pas moi qui ai pété, c'est c'est c'est juste un bruit de bouche,
je fais très bien le P mais comme vous voyez pas mon visage
je vous croyais que j'ai vraiment pété.
Mais non c'est genre je fais très bien le P avec mes lèvres.
Voilà, chacun ses trucs. Donc ce qui va se passer, c'est
que quand mes cellules sont en suspension et que j'ai envie de
leur changer le milieu parce qu'elles ont tout bouffé, parce
qu'elles ont que des détritus, parce qu'elles ont que des
métabolites toxiques, et cetera. Ben j'absorbe tout.
Je mets ça dans un super Tube, ça va à la centrifugeuse.
Je ne récupère que le culot et je le remets en culture.
Et donc pour vous accompagner sur tout le processus, on va se
poser la question, Eh comment on fait pour récupérer le culot
sachant qu'il y a le surnageant au dessus ?
Et donc là on va s'amuser à faire la dextérité niveau Bac
+10 ? Moi même j'étais au labo, j'ai
fait ça, donc vous avez votre tube, vous avez vos cellules qui
sont toutes rabougries dans le fond et vous avez un gros
liquide au-dessus, donc vous prenez votre pipette.
Et là Ben j'ai envie de vous dire, on reprend les mêmes et on
recommence. C'est exactement comme si vous
aviez des cultures qui étaient adhérentes aux parois pour votre
culture cellulaire. Au début vous prenez.
Et vous absorbez tout le liquide qu'il y a au-dessus.
Donc quand vous devez absorber le liquide et vous mettez la,
comment dire, vous mettez la pipette relativement haut, c'est
assez facile. Et puis quand vous commencez à
jouer un peu à la limite entre cellule et liquide, bon
normalement on essaie d'être dans un style où j'épargne des
cellules et je vais essayer de pas trop en prendre.
Donc on préfère laisser éventuellement un tout petit peu
de liquide méchant parce que bon, c'est pas très grave de
laisser un tout petit peu de métabolide dégueulasse si après
j'ajoute un nouveau milieu et après qu'est ce que je fais ?
Et Ben je prends mon milieu. Mon super milieu bien nutritif,
dans ma boîte qui coûte, qui coûte des fois un peu cher.
D'ailleurs, je prends mon milieu avec ma pipette, je le mets dans
ces petits culots qui restent éventuellement avec une toute
petite couche de liquide. Et du coup, je m'amuse à faire
des allers-retours avec ma pipette pour faire en sorte de
attention. Le mot est important, mettre en
suspension mes cellules. Parce que vous comprenez, quand
vous passez à la centrifugeuse, vous avez une machine qui tourne
mais qui tourne à une vitesse. C'est un truc de fou furieux.
Donc vous avez vos cellules qui sont tout à fait en bas parce
qu'elles ont vraiment eu une force physique, la force de
centrifugature qui les a fait complètement rabougrir sur le
fond. Et donc ça constitue comme une
forme de corps un peu solide. Donc vous prenez votre eau,
votre eau nutritive, donc votre milieu de culture 9 frais, avec
les nutriments, le glucose, et cetera.
Et vous vous amusez à jouer un petit effet de pression et vous
faites comme une vague au fait. Et vous vous amusez à essayer de
les désolidariser, de les décompacter de faire en sorte.
Bah c'est comme si vous avez du chocolat en poudre et que vous
avez un gros bloc. Et puis vous vous amusez à
mettre du lait avec une petite pression pour faire en sorte que
Ben le gros bloc se dissolve et que, au lieu d'avoir Ben
beaucoup de lait blanc et un tout petit peu de bloc chocolat
noir, j'ai juste un grand chocolat au lait quoi.
C'est un peu ce qu'on fait, mais sauf que c'est avec du vivant,
donc on s'amuse à faire ça. On remet nos cellules en
suspension. Et on le remet dans la boîte et
roule ma poule. J'ai gardé mes cellules qui ont
réussi à avoir cette fois-ci un nouveau milieu de culture.
Donc quand on vous parle de passage, là pour le coup je fais
la petite précision, Regardez un peu de quoi on parle dans votre
fac parce que dans certains comment dire dans certaines fac
on va vous dire que le passage c'est le fait nécessairement de
devoir passer dans un autre milieu et de faire en sorte
qu'ils aient plus de place. Et des fois c'est juste changer
le milieu de culture comme ce que je suis en train de vous
dire. Donc entre changer le milieu de
culture et changer le milieu de culture, plus donner plus de
place. On va dire que allez, on va dire
des fois c'est plus souvent juste changer de milieu de
culture parce que j'ai pas besoin d'avoir des cellules à
l'infini, à moins que mon expérience me demande d'avoir
d'autres cellules ou d'en avoir plus.
On va dire que changer de milieu de culture comme ce que je viens
de vous dire pour les cellules adhérentes, c'est facile.
Pour les cellules en suspension, je passe d'abord à la
centrifugeuse centrifugeuse centrifugeuse.
Putain, vraiment je, je commence à bégayer.
C'est la centrifugeuse du coup, et après vous remettez en
suspension le culot, vous remettez ça dans la petite boîte
et roule ma poule. Bien, on a parlé du milieu,
d'accord, on a parlé du type cellulaire, on a parlé de la
prolifération des cellules qui adhèrent à la paroi des cellules
qui n'adhèrent pas à la paroi. Maintenant on va parler d'une
petite question pour finir l'épisode, est ce que mes
cellules sont saines ? Ça veut dire quoi ?
Bah est ce que mes cellules ne sont pas malades quoi ?
Alors nous on est des êtres pluricellulaires quand je vous
parle de maladie, bon il y a plein de trucs hein, il y a il y
a le rhume, il y a le COVID, il y a la grippe, il y a le
diabète, il y a le sida, il y a le cancer, il y a la Vic, enfin
bon, bref, il y a plein de trucs.
Les cellules, c'est relativement con hein.
Donc la maladie classique qui peut toucher une cellule, c'est
le fait que ce soit une cellule tumorale, donc une cellule
cancéreuse. Qu'est ce que c'est qu'une
cellule cancéreuse ? Une cellule cancéreuse c'est une
cellule qui a décidé de dire va te faire foutre, merde.
J'ai dit un gros mot non, j'ai la flemme de le refaire.
Bon l'épisode serait explicite, c'est une cellule qui a décidé
de dire va te faire foutre aux règles, qui te dit voilà quand
est ce que tu es censée te diviser et qui se divise comme
elle le veut. Et donc vous imaginez bien que
si une cellule décide de se diviser beaucoup trop
rapidement, Ben elle risque d'occuper trop d'espace.
Ce qui est vrai dans ma petite boîte dans le laboratoire est
encore plus vrai dans mon corps humain.
Parce que dans le laboratoire je me dis Oh là là Michel, ma boîte
elle est pleine. Bon c'est pas grave, je vais
faire un petit passage, je vais les mettre dans une autre boîte,
elles auront plus de place les coquines.
Ben non, dans la vraie vie, si au niveau d'une partie de je
sais pas moi du poumon ou du pancréas, ou je sais pas moi de
l'estomac de Michel, il y a une cellule qui décide de dire Fuck
off. Je commence à me développer et à
me multiplier autant que je le veux.
Ben Michel va avoir un cancer du poumon ou un cancer du pancréas
ou un cancer de l'estomac. Et comme on peut pas s'amuser à
faire un passage dans la vraie vie parce que Ben mon organe il
est limité dans l'espace, Ben vous allez tout simplement avoir
une boule. Une tumeur qui va commencer à se
développer et qui non seulement va prendre de la place, va faire
pression sur les autres cellules saines, va s'accaparer beaucoup
de nutriments et va dégager beaucoup de cochonneries.
Et des fois comme la place n'est pas assez suffisante, Ben la
tumeur. Peut décider d'aller ailleurs,
elle fait son propre passage. Et quand la tumeur qui s'est
déclarée initialement dans un organe décide d'aller dans
d'autres organes, alors nous quand on change de boîte, on
s'appelle, on appelle ça juste un passage.
Voilà un passage un peu de luxe parce qu'on leur fait changer de
de boîte, on leur donne plus de place.
Bah au niveau biologique, quand la tumeur décide d'aller voir
ailleurs pour avoir plus d'espace à coloniser, c'est ce
qu'on appelle des métastases. Donc vous voyez finalement
l'oncologie, l'oncologie, c'est l'étude des cancers.
La biologie, et quand on vous parle des maladies, et cetera,
ça peut paraître un peu tricky, un peu en mode ouh là là, c'est
compliqué, mais des fois ça suit vraiment des principes
relativement universels, occuper de la place, se diviser, se
propager et aller ailleurs pour avoir plus de place.
Sauf que moi dans mon corps, j'ai pas de box de stockage,
j'ai pas. Alors tu sais quoi Michel ?
Si y a un si y a une tumeur, tu l'envoies là-bas.
Ouais, j'ai loué un box de 5 m², c'est trop bien.
Ben non, c'est c'est ça en fait, le cancer, c'est juste.
Une cellule qui ne respecte pas l'emploi du temps et qui décide
de se diviser. Sauf que ça va bien sûr avoir
des conséquences absolument dramatiques.
Bien parce que ça va venir toucher le reste du corps, parce
que ça va venir vous enfin affaiblir.
Michel, ça va venir prendre une partie de la circulation
sanguine, une partie des nutriments, ça vient grossir, ça
vient impacter la vie de façon générale.
Et puis bon, j'ai pas besoin de vous l'apprendre, les cancers
malheureusement tuent chaque année des milliers de personnes,
des 1000000 de personnes, même au niveau du monde.
Et donc voilà, ce que c'est qu'une cellule tumorale, voilà
ce que c'est qu'une cellule cancéreuse.
Et Ben croyez-le ou non, croyez-le ou non, enfin
croyez-le du coup parce que si vous le croyez pas ça ça bah ça
ça m'arrange pas, enfin ça vous arrange pas hein, parce que
c'est vous qui passez le concours hein.
Moi c'est bon moi je suis déjà docteur, des fois on étudie dans
un laboratoire avec des cellules cancéreuses.
Ah non mais si oui pourquoi tu dis ça ?
Bah oui vous savez pourquoi ? Parce que ce qui est
excessivement chiant. Quand les cellules sont dans le
corps de Michel, c'est que ce sont des cellules qui se
divisent à tout va, qui ont plein de mutations, qui
respectent rien, qui sont beaucoup plus résistantes des
fois, qui sont carrément on va dire carrément immortelles, qui
s'amusent à se diviser à tout va.
Mais autant c'est vraiment horrible quand ça arrive dans le
corps de quelqu'un, autant quand on est derrière la paillasse on
se dit hé jackpot. Bah dis donc Michel, c'est des
cellules qui n'arrêtent pas de se diviser, qui ne meurent pas,
qui sont grosso modo immortelles.
Bon, les cellules immortelles c'est vraiment après plusieurs,
plusieurs, plusieurs, plusieurs divisions, donc c'est pas c'est
des cellules tumorales plus plus on va dire qui sont pas très
chiantes, qui même lorsqu'elles arrivent en confluence elles
font pas leurs chochottes parce qu'elles sont relativement
résistantes et qui arrivent à se multiplier assez facilement.
Donc les cellules cancéreuses dans le corps, non, non non non
non, mais les cellules cancéreuses au laboratoire, oui
voilà. J'ai j'ai j'ai pas envie de dire
cette phrase parce qu'elle a l'air horrible, mais le malheur
des uns fait le malheur des autres.
Non je veux pas dire cette phrase Je la retire, je la
retire et en même temps je la retire qu'à 95% parce que il y a
une petite partie de on utilise les avantages avec beaucoup de
guillemets de la cellule cancéreuse pour la rendre.
Ben une super comment dire, un super outil de travail en
biologie. Alors là pour le coup on va pas
faire les cellules cancéreuses pour se dire alors va voir
comment la cellule elle se comporte dans son environnement
naturel non là pour le coup on va y aller en mode bon.
Soit directement pour faire des essais pour voir, est ce que ça
va flinguer la cellule cancéreuse pour des essais de
traitement ? Soit au contraire c'est juste
pour pouvoir étudier quelque chose et j'ai besoin d'avoir des
cellules relativement costaud, des cellules qui peuvent rester
vivantes ou des cellules qui sont relativement on va dire
stables entre les divisions et qui Ben je sais qu'elles vont
pas me lâcher au bout de 20 divisions en me disant Ah non
devient des cellules sénescentes, on est fatigué
parce que Ben en fait c'est des zombies quoi.
Les cellules normales c'est des êtres vivants.
Voilà ils sont vivants, mais au bout d'un moment ils vont crever
les cellules. Tumoral immortel rendu immortel
parce qu'elles se sont divisées 50*100 fois, enfin elles se sont
divisées un nombre incalculable de fois, ce qui fait que après
bah au bout d'un moment elles deviennent complètement stables,
elles vont réussir à se diviser, identiques elles-mêmes, ça
devient des zombies ou des vampires ou des momies.
Enfin bon bref je pense que ça et ça ça ça ça dépend du film
que vous Regardez, mais en gros c'est moche.
Ouais mais hé ça assure une forme de stabilité et donc on
peut faire des supers études dessus.
Et là je vais vous raconter l'histoire des cellules est là
et là et là et là je regrette cette chanson.
Donc les cellules est là donc et là HELA c'est probablement des
cellules que vous avez déjà vues dans vos cours, dans vos Poly ou
quelque chose. Et on va parler aujourd'hui de
Ben qu'est ce que c'est ? Alors pourquoi on écrit les
cellules HELA ? Je précise même h MAJUSCULE El
Majuscule a ? Bah parce qu'au fait c'est des
cellules qui portent le nom de la personne d'où proviennent
initialement ces cellules. C'est une brave dame qui
s'appelle enfin qui s'appelait du coup Henriata Lax et qui est
morte en 1951. que Dieu et 100 que que merde que qu'est ce
qu'on dit quand une personnellement on peut dire
qu'elle repose en paix, paix à son âme et que Dieu y a y a pas
un truc qui commence par que Dieu que Dieu repose.
Non c'est pas ça bon bref elle est morte la pauvre.
Mais avant de clamser donc, elle est partie à l'hôpital John
Hopkins, Hein ? Si vous êtes curieux aux
États-Unis. Et du coup le médecin lui a
prélevé sans vraiment l'en informer des cellules de des des
cellules de sans cancer du col de l'utérus.
Parce que c'est ça qu'elle avait la la pauvre dame, un cancer du
col utérin ou servix. Comment dire en anglais ?
Et donc du coup il a prélevé ses cellules sans l'en informer
parce que finalement lol. Et il a essayé de cultiver ces
cellules. Et contrairement à d'autres
cellules cancéreuses qui tenaient pas vraiment bien la
route au bout de quelques temps, bah il s'est rendu compte que
les cellules de Henry Lake, Ben elles tenaient quand même
relativement bien la route. Et elles tiennent tellement bien
la route que jusqu'à présent, en 2024, ça date de 51.
Donc ça fait quasiment 75 ans cette histoire.
Ben on continue encore à s'échanger ces cellules.
C'est à dire que à l'échelle mondiale, la dame elle est morte
depuis très longtemps la pauvre. Et on continue encore à
travailler sur des cellules qui viennent de sa schneck qui
viennent de son cancer du col de l'utérus.
Voilà la petite histoire des cellules est là.
Alors vous vous doutez bien que ces cellules là mais quand je
vous dis elles sont flinguées mais genre c'est c'est c'est
c'est peu de le dire, elles sont archi flinguées, elles ont eu un
nombre de multiplication, de division, de de mutations.
Genre vraiment vous Regardez leur noyau, vous Regardez leur
caryotype, genre pour voir un peu l'a DN et tout.
C'est une boucherie, genre vraiment on dirait même pas que
ça vient de l'être humain quoi, ça a été tellement muté.
Enfin on on on, on se douterait à peine que c'est du vivant,
mais hé, c'est pas très grave lol, parce que ça reste une
cellule, donc ça peut quand même me permettre de faire une
culture cellulaire, ça peut me permettre d'avoir des effets et
de pouvoir étudier un métabolisme.
Ça peut me permettre de pouvoir étudier les effets de mon
médicament, ça peut me permettre d'effectuer comment dire de de
voir si mon médicament atteint la santé de mes cellules, donc.
Qu'on soit d'accord, les cellules qu'on appelle les
lignées quand on vous parle de lignées, on vous dit ouais ça
c'est une lignée cellulaire. Quand on vous dit lignée il faut
que dans votre tête ça fasse, non je peux faire mieux, il faut
que dans votre tête ça fasse voilà, et dans votre tête ça
doit faire pour vous dire hé, si c'est une lignée, ça veut dire
que en gros, elles sont toutes un peu pareilles, c'est un peu
stable dans le temps, genre c'est répété, répété, répété,
répété, répété, répété. Donc du coup c'est une cellule
cancéreuse slash, une cellule immortelle.
On va pas vous dire cellule cancer, on va vous dire Ouais
c'est une cellule immortelle, genre vous avez pensé à Twilight
on va dire Ouais c'est Robert Pattinson, il ne vieillit
jamais, mais ça veut juste dire qu'au fait c'est un vampire
quoi. Donc là pareil on va dire ouais
c'est une lignée cellulaire, vous allez penser à la lignée
royale, on va vous dire Ouais c'est une cellule immortelle,
waouh. Oui ça veut juste dire que c'est
une cellule cancéreuse qui est immortelle certes, mais vous
Regardez l'intérieur, c'est juste un bordel pas possible.
Donc les lignées cellulaires vous vous doutez bien qu'on va
pas les utiliser. On va pas les cultiver juste
pour se dire Waouh c'est trop beau, c'est trop joli.
On les fait parce que d'accord, ça c'est quand même assez
éloigné de ce qu'est censé être une cellule eucaryote du règne
humain. Mais hé, ça reste des cellules
donc je peux quand même faire des manipulations dessus.
Et donc j'en profite pour finir l'épisode sur cette distinction
absolue qu'il faut faire entre la culture cellulaire primaire
et les cultures cellulaires. Secondaire, on fait des bruits
comme on peut. Donc la culture cellulaire
primaire, c'est grosso modo la culture Ben des cellules qui
viennent, des organes qui viennent de mon patient, qui
viennent d'une étude, donc en vrai c'est tout beau, c'est tout
propre, c'est frais, consommer local ça vient de sortir, c'est
au marché du village, là pour le coup on peut faire des études
dessus, on peut regarder comment est ce qu'il se, comment dire,
comment est ce qu'il se comporte, on peut voir si y a
pas des problèmes en biopsie, et cetera, on peut faire réellement
une étude sur ces cellules. L'avantage c'est que c'est tout
frais. L'inconvénient c'est que ça va
pas tenir très longtemps. De l'autre côté on peut faire
des études sur des cellules et là sur des cellules qu'on
appelle les lignées. L'inconvénient c'est que c'est
complètement flingué, donc on peut pas faire un truc très très
très précis ou un truc très très personnalisé.
Mais l'avantage c'est que ça tient, c'est que c'est
résistant, c'est que ça continue à se multiplier et que si je les
flingue c'est pas grave, il y en aura d'autres.
Vraiment les cellules est là, genre enfin vraiment c'est
présent dans tous les labos de tout le monde quoi, ça a démarré
dans le concert du col de l'utérus d'une pauvre dame au
milieu du siècle passé, et là maintenant c'est présent dans
quasiment je sais pas combien de 1000000 de paillasses à travers
le monde. Comme quoi voilà et telle alors
ceux qui croient qu'elle est connue alors que Henry Interlax,
on est tous en train d'étudier avec des cellules qui viennent
de elle quoi, genre what ? Enfin bon.
Bref, voilà pour le petit topo sur les cellules est là.
Donc voici donc ce qui conclut l'épisode sur la culture
cellulaire, je pensais pas que ça allait tenir aussi longtemps,
mais bon, j'ai préféré bien en parler.
La culture cellulaire qui je le répète, est plutôt une première
étape quand on fait de la biologie, parce qu'après on va
faire plutôt d'autres manipulations derrière.
Mais des fois on va vous en parler dans les danseurs, on va
vous dire ouais, on fait ça une centrification, on récupère le
culot, le tir d'agent, on prend du milieu, et cetera, et cetera.
On peut vous embrouiller facilement, là au moins vous
connaissez vite fait les étapes, les cellules, le milieu et
compagnie. Petite précision sur le milieu,
des fois, on peut prendre ce qu'on appelle du sérum de veau
fœtal, ça veut littéralement dire ce que ça veut dire.
Donc le sérum de veau fœtal c'est très cool parce que c'est
très riche en nutriments. C'est super, mais c'est l'aile
vif, très bien dessus. L'inconvénient, c'est que Ben,
c'est un sérum de veau fœtal. Donc ça quand même soulève pas
mal de questions vis-à-vis du bien être animal et vis-à-vis de
l'éthique. Donc bon des fois ça tend à être
remplacé vers des sérums non animaux pour faire en sorte que
on puisse quand même donner à nos cellules.
Bah tout ce qu'il faut sans pour autant venir faire chier des
veaux au niveau fœtal. Voilà, j'espère que l'épisode du
jour vous aura plu. On se retrouve demain pour le
jour 3 et demain on va faire un super bangger.
Demain on parle de la cytométrie de flux et donc on va parler du
fax. Je dis bien cytométrie de flux.
Peut être que vous dites cytométrie en flux mais non,
c'est la cytométrie de flux qu'on peut également appeler
fax. C'est pas le fax.
Ouais je t'envoie un fax Michel. Non c'est fax FACS voilà.
Parce qu'il y a des petits acronymes comme ça, on croit
qu'on les comprend. Et puis quand vous les voyez
écrit, vous dites, Ah, ça voulait dire ça, I'm give you on
Heaven better. Quand j'ai commencé mon stage à
l'hôpital, on parlait de CQ. J'ai compris que c'était la CQ,
genre SE accent aigu, CU, genre pour dire la sécurité.
Finalement, c'était le CQ, la lettre C et la lettre Q pour
dire le contrôle qualité. Donc voilà c'est bien de le
savoir plus tôt. Donc là quand je vous dis fax
c'est FACS. Et c'est pour parler du coup de
la citométrie de flux, une méthode très très très très très
importante en biologie où là pour le coup vous pouvez avoir
pas mal de figures et vous allez découvrir tout ce qu'il faut
savoir sur la cittométrie de flux demain dans le prochain
épisode du calendrier de l'Avent sur past à pass, on s'abonne, on
active la cloche, on met une évaluation 5 étoiles et je vous
dis à demain bisous.